實驗步驟：1
1. 樣品準備
裂解液（RIPA）準備-----每100 ul RIPA加入1 ul PMSF和1 ul的原釩酸鈉溶液，現配現用。加入PMSF，加入原釩酸鈉溶液。
組織樣本-----黃豆大小組織剪碎，加入200-300 ul配備好的裂解液，冰上研磨，12000轉離心5 min，取上清。
貼壁細胞-----6孔板一個孔長滿，加150 ul配備好的裂解液，冰上裂解5-10 min，槍頭吹打，吸取裂解好的樣本，轉入EP管，12000轉離心5 min，取上清。
懸浮細胞-----細胞轉入離心管，2000轉離心5 min，棄上清，加入PBS清洗，2000轉離心5 min，棄上清，每20 ul體系細胞加入150 ul裂解液，冰上裂解5-10 min，槍頭吹打充分裂解，12000轉離心5 min，取上清。

2. 蛋白濃度測定
標準曲線制備
待檢樣本上樣
加入顯色劑，室溫避光20-30 min
酶標儀測定OD值
計算蛋白上樣量（建議每樣本上樣總蛋白含量為50 μg）

3. 樣本變性
每40 μL蛋白，加10 ul的5XSDS 上樣緩沖液
沸水浴10 min
-20℃保存

4. SDS-PAGE膠制備
灌入分離膠
無水乙醇壓平
分離膠完全聚合后，倒出無水乙醇
雙蒸水沖洗
濾紙吸干
加入濃縮膠
插上梳齒
濃縮膠完全聚合后取出梳齒

5. 電泳
膠固定到電泳槽
倒入電泳液
加樣，加marker,
電泳----80 V恒壓至溴酚藍到濃縮膠與分離膠交界處，改110 V恒壓至溴酚藍到凝膠底部